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尊龙凯时线粒体超氧化物染色技术

来源:从庆广 日期:2025-03-14

尊龙凯时推出的BBcellProbe®M23线粒体超氧化物染色探针(BB-441153)是一款新型的细胞渗透型荧光染料,专门用于选择性标记活细胞中的线粒体。该探针包含一个弱巯基反应性的氯甲基官能团,能够有效穿过细胞膜并聚集在活跃的线粒体上。

尊龙凯时线粒体超氧化物染色技术

经过简单的细胞孵育,BBcellProbe®M23立即进入线粒体,并迅速被超氧化物氧化,产生绿色荧光。此探针具有优良的选择性,仅被超氧化物氧化,而不会与其他活性氧类(ROS)或活性氮类(RNS)发生反应。经过氧化反应后的产物可以与核酸结合,从而释放出大量的绿色荧光,提升了检测的灵敏度和准确性。

按照每个样本使用100µl染料的计算,这款试剂盒可处理30至150个样本,甚至可处理60至300个样本。此外,尊龙凯时的BBcellProbe®系列线粒体探针提供多种颜色选择,适合用于多色标记实验。除了绿色荧光探针外,尊龙凯时还提供红色、蓝色和橙色等其他染色试剂盒,以满足不同样本的需求。

检测方法

推荐使用荧光显微镜或激光共聚焦显微镜进行观察,样本类型包括悬浮细胞和贴壁细胞。在样本制备方面,使用小包装试剂盒(BB-441153-30T)时,可向探针管中加入10µl无水DMF进行充分溶解;而大包装试剂盒(BB-441153-60T)则需加入20µl无水DMF。

染色工作液的制备

依据样本数量,将BBcellProbe®M23荧光染料母液进行10倍稀释,随后再用HBSS缓冲液或对应的培养基进行50-100倍的进一步稀释,制成染色工作液。

细胞染色步骤

对于贴壁细胞:

1)将细胞样本准备在培养皿或培养板中。
2)待细胞生长至合适密度后,吸去培养液,加入预热至37℃的探针工作液。避光条件下孵育30至60分钟,具体时间需根据细胞类型进行预实验优化。
3)用新鲜培养基替换染色液。
4)在荧光显微镜(带合适滤片)或激光共聚焦显微镜下进行观察,最大激发/发射波长为488/510 nm。

对于悬浮细胞:

1)离心并吸去上清。
2)使用预热至37℃的探针工作液重悬细胞,同样避光孵育30至60分钟,具体时间视细胞类型而定。
3)离心后吸去染色液,加入新鲜培养基重悬细胞。
4)观察方法同样适用于荧光镜、流式细胞仪或荧光酶标仪,最大激发/发射波长为510/580 nm。

尊龙凯时致力于提供优质的生物医疗产品,帮助科研人员在细胞生物学研究中获取准确可靠的数据。通过选择合适的染色探针和方法,科研人员将能够有效监测细胞线粒体的超氧化物状态,为生命科学研究提供强大的支持。

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