尊龙凯时的小鼠肺微血管内皮细胞构成了一个半选择性的屏障，对于肺部气体交换、液体及可溶物的调节具有重要的生理功能。此外，这些细胞也具备代谢能力，可以执行一些非呼吸相关的功能。在肺损伤的情况下，肺微血管内皮细胞是活性氧的重要靶细胞之一。在肺炎的进程中，神经体液介质和氧化剂对内皮细胞产生作用，导致细胞间隙渗透性增加，从而使得蛋白质从血液进入间质。这种渗透性的增加会导致低氧血症并引发成人呼吸窘迫综合征和非心源性肺水肿。

小鼠肺微血管内皮细胞来源于实验动物的正常肺组织，细胞形态为上皮样和多角形，能够在贴壁培养条件下生长。通过CD31免疫荧光染色标记，确认这些细胞阳性，且细胞纯度高于90%。此外，该细胞群体不含HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。

实验所需器材与试剂

1. 仪器设备

• 生物安全柜: BSC-1500ⅡA2-X
• CO2细胞培养箱: BC-J160S
• 荧光倒置显微镜: DS-Ri2
• 高速冷冻离心机: Multifuge X1R
• 电热恒温鼓风干燥箱: DHG-9123A
• 电热恒温震荡水槽: DK-2B

2. 试剂耗材

• T25细胞培养瓶: 430639
• 血球计数板: Neubauer improved
• 24孔板专用细胞爬片: YA0350
• 细胞培养孔板: WHB-24
• 胎牛血清: 1414426
• 内皮细胞培养基: Primed-icell-0020
• 25%胰蛋白酶（含0.02% EDTA）: 1734858

小鼠肺微血管内皮细胞的分离与培养方法

1. 将5-10天的乳鼠浸泡在75%乙醇中，然后转移至生物安全柜。
2. 从胸部解剖乳鼠，取出双肺，放入预冷的PBS中，尽量去除结缔组织等杂质。
3. 取肺的边缘部分，剪碎组织块并放入T25培养瓶，倒置于细胞培养箱中。
4. 2小时后，向培养瓶中加入2 mL内皮培养基，小心将其正置，确保组织块不漂浮。
5. 每3天更换2 mL培养基，当细胞从组织块中爬出后，改为每2天更换一次。当细胞融合度达到60%-70%时，去除组织块，并将肺微血管内皮细胞重新铺瓶。

需要更多的分离培养方法，可以查阅尊龙凯时官方网站以获取详细信息。