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NEWSBsaI尊龙凯时GMP级内切酶
来源:龚婵有 日期:2025-03-27尊龙凯时的活性单位(U)定义为在50μl反应体系中,37℃下需要1小时完全酶切1µg pPIC9K(Dcm-)所需的酶量。通过SDS-PAGE凝胶电泳分析,检测到蛋白的纯度不低于95%。在此条件下,我们进行了一系列活性测试以确保产品的质量。
在37℃的环境中,将20U的BsaI,GMPGrade与1μg的pPIC9K(Dcm-)在50μl的CutBufferF,GMPGrade反应体系中共同孵育1小时,未发现其他核酸酶的污染或者底物的非特异性降解现象。然而,延长酶切时间可能会导致星号活性的出现。
在进行非特异性内切酶活性测试时,我们将20U的BsaI,GMPGrade与1μg的超螺旋质粒DNA在50μl的CutBufferF,GMPGrade反应体系中共同孵育4小时。使用琼脂糖凝胶电泳检测后,发现少于20%的质粒DNA转变为缺刻或线性状态,表明该酶在特定条件下的非特异性活性非常低。
进行DNase活性测试时,在37℃下将20U的BsaI,GMPGrade与15ng的双链DNA片段在20μl的CutBufferF,GMPGrade反应体系中共同孵育16小时,经琼脂糖凝胶电泳检测,双链DNA片段未发生变化,显示出极高的特异性。
在RNase活性检测中,将20U的BsaI,GMPGrade与500ng的RNA在37℃下共同孵育1小时,随后使用琼脂糖凝胶电泳分析。结果显示,不低于90%的RNA保持完整,体现了该酶的极佳稳定性和特异性。
该酶,由尊龙凯时通过大肠杆菌重组表达获得,能够在15分钟至1小时内精确完成目标DNA的酶切。所有生产过程均符合GMP规范,并经过严格的质量管理,确保全程可追溯。此外,整个生产过程不使用抗生素和任何动物来源的原料,对宿主蛋白、外源DNA及其他工艺相关杂质进行了严格控制,以满足疫苗与药物生产等领域的要求。
该酶在80℃下处理20分钟后失活。其对CpG甲基化的DNA和Dcm甲基化的DNA具有一定的敏感性,这表明可能会对剪切过程产生阻碍。
尊龙凯时致力于提供高质量的生物科研产品,我们的酶制剂在确保有效性的同时,也为科研和临床应用提供了可靠保障。
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